探讨微波辐射对雄鼠的生精功能的影响及巴戟天对损伤后雄鼠的生精功能的修复作用。
一、材料与方法:
(一)实验动物模型和分组:选取成熟雄性大鼠24只,体重范围264~358g,平均(316±30)g,(由福建医科大学动物实验研究中心提供),随机平均分为三组,每组8只放入鼠笼中,动物自由体位,在相对湿度为45%,常温下进行饲养。
①空白组:常规饲养,不辐照。
②辐射组:对讲机(深圳特易通TYT-3207),频率150MHz,照射时间均为2h/d,两部对讲机(一部用于发射信号,一部用于接收信号)天线距离为15cm,置于鼠笼中央,大鼠距离对讲机天线约12cm,经测定辐照强度300μW/cm2,持续一周。
③给药组:采用相同条件对讲机辐照,照射时间均为2h/d,持续一周。同时每天在卯时(5:00~7:00)巴戟天(注:煎煮巴戟天:取720g巴戟天用7倍水浸泡1.5h,煎煮30min,药渣用4倍水煎煮20min,最后2者混合浓缩成240ml)灌胃给药,30g/kg,1次/d,持续一周。
(二)指标的测定:
1.睾丸指数、附睾指数:在辐照的第7天三组的大鼠逐一称重,大鼠腹腔注射10%水合氯醛(350mg/kg)麻醉后,取左侧睾丸和附睾,并逐一称重。根据睾丸指数=睾丸重量/体重;附睾指数=附睾重量/体重,计算每只大鼠的睾丸指数和附睾指数。
2.精子活动率、精子密度:
取右侧附睾尾,称重后置于15ml生理盐水(37℃预温)的小平皿中,用眼科小剪子剪碎,吸管吹打,四层擦镜纸过滤,最后将悬液稀释至20ml。
精子悬液置于37℃孵育15分钟,用红细胞计数板,在高倍镜下计数200个精子中活动精子数。于60℃水浴中处死精子,按红细胞计数法,计数5个中方格内精子数。从而计算出精子活动率、精子密度(每克附睾尾所含的精子数)。
3.数据处理:实验数据采用(x±s)表示,采用SPSS统计软件包进行方差齐性检验和单因素方差分析。
4.睾丸的组织学观察:
将所取出的右侧睾丸置于4%多聚甲醛固定过夜、常规脱水、透明、包埋,切片4μm,苏木精-伊红(HE)染色后封片。在显微镜下观察睾丸切片,高倍镜下任取4个管腔,用“+~++++”表示每个管腔中的精子的数量。
第十二届“挑战杯”省赛作品 省赛三等奖
2010年10月 作品在《解剖学研究》杂志上发表。